质粒被双酶切后,自身不能连接成环状,能否进入受体细胞

1）利用DNA连接酶便可以将目的基因（已经剪切下来的）连接到质粒载体上2）目的基因的获得：利用限制性内切酶（限制酶）.这种酶具有专一性...可以识别特定的回文序列来进行剪切.3）如果你想得到一种基因,

楼上错.胃不消化自己是因为胃黏膜,没有胃黏膜的话胃自己就把自己烧了,医学上叫胃溃疡,严重的叫穿孔.溶酶体的作用方式不是这样.而且,把器官和细胞放到一个层面类比是不合适的.回楼主,溶酶体不降解自身的原因

不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问：我前些天去遇到一样的问题，酶切鉴定正确，但测序后什么也不是呢再答：所以

具有相同的粘性末端的两条DNA链在连接酶的作用下相连.只有一种酶切时,切出的粘性末端相同,让目的基因和质粒相连接即可,但是由于是混合,连接的结果不尽相同.DNA连接酶将目的基因和质粒粘性末端的3-5磷

“两条目的基因的1处粘性末端不也可以链接吗?”,当然存在这种可能性.但用两种限制性内切酶切割最主要的目的是防止载体切割后的自连,几率不但大,而且可以产生克隆,大量的自连会影响挑选重组的克隆.

确实可以不一定要TA克隆.你可以在设计引物的时候在引物的5'端加上酶切位点,比如你选中XXXYYY位点你可以把引物设计为AA－XXXYYY－AGCT(AGCT代表你原来的引物序列）.我一般在头上加2个

就是找到互补的碱基对再问：正向与反向的区别在哪儿呢？再答：不要在意细节

分子水平上,用人工的方法提取（或者合成）不同的生物的遗传物质,在体外切割拼接和重新组合,然后通过不同方法把重组的DNA分子引入受体细胞,使外源DNA在受体细胞进行复制与表达,按人的需要生产不同的产物或

基因表达载体上面有基因表达需要的部件,例如35S启动子等等.如果连接反了,当然就不能表达了.再问：为什么就不能倒着翻译呢再答：基因是有方向的。启动子一般在5‘端再问：基因是有方向的,是什么？再答：基因

需要两端都结合首先因为是同一种限制酶切割产生的黏性末端相同在适宜条件下两端都会链接不会出现一端相连而另一端不相连的情况其次细菌质粒上会拼接上目的基因的启动子和终止子必须要两端相连才能表达目的基因并且质

如果是重组质粒的话,应该两种,正义基因表达载体和反义基因表达载体.再问：���������廹���������������ͷ��������������

双酶切,然后做ligase连接就好.连接的过程中会出现很多突变.然后你把连接的产物做转化.如果有条件可以使用电激转化,这个转化的效率非常点（连接产物本来就不多,突变又多）.如果条件不够就用热激转化,热

问题描述不清.“同时做对照：质粒酶切回收的产物电转”?也就是说拿线性的质粒去电转做对照?如果是这样,你不如用感受态细胞直接做阴性对照,再用原质粒转化做阳性对照,这样更好分析结果.多克隆位点是很小一段,

重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在

如果是双酶切,而且两个酶切位点不能形成自连,那么插入目的基因也只能获得一种重组质粒.如果是单酶切,或者双酶切的两个酶切位点是同尾酶,那么插入目的基因能获得两种重组质粒.

重组体

1.是的,这是细菌自身细胞质内的一段裸露的环状DNA.内切酶有辨别能力,要不我们自身的DNA就被切断了.同上.2一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后,将酶切片段插入到载体DNA分子中,所有

第一,质粒转化感受态细胞时,只需要一定量的质粒完成转化即可,因此没必要使用高浓度的质粒.第二,质粒是环状的,浓度过高会使得发生断裂,聚集等.第三,浓度过高,溶液比较粘稠,不利于扩散.

“单酶切可以切开,而且质粒的大小明显小于空质粒”,首先你的表达有误,单酶切可以切开,说明目的基因有连接上,那么重组载体该是比空载大的.质粒稀释100倍后PCR,有目的条带,也说明了是阳性克隆.有拖带,

启动子有自己的碱基序列会进行识别再问：大侠，如果我插入两个目的基因片段，如何控制他们两个的表达量呢再答：放在特定的培养基中基因的表达是先复制进行转录和翻译所以是由基因本身控制的