如何使目的基因连接到质粒载体上,目的基因怎么获得呢?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 06:28:59

如何使目的基因连接到质粒载体上,目的基因怎么获得呢?
如果我要一种细胞因子的基因,怎样才能得到呢?应该选择什么样的质粒载体呢?

1）利用DNA连接酶便可以将目的基因（已经剪切下来的）连接到质粒载体上
2）目的基因的获得：利用限制性内切酶（限制酶）.
这种酶具有专一性...可以识别特定的回文序列来进行剪切.
3）如果你想得到一种基因,有多种方法.
其一：鸟枪法.就是多份样品各添加一种限制酶,然后筛选.
其二：人工合成法.就是利用核苷酸拼接成mRNA然后逆转录出相应的基因外显子之后再人工添加内含子就可以了,不过这种方法必须要知道相应的基因序列.
其三：反转录法.这个同上一个的区别就是——mRNA是提取的并不是人工合成的,后面的步骤一样.
二三种方法有一个局限——只能用于真核生物的DNA提取.
4）至于细胞因子的基因...你从大肠杆菌中弄出来质粒接上目的基因然后在放回去应该就可以了.
这些问题在中国地图出版社出版的高中生物教材选修三中有比较详细的介绍,你可以弄本来看看.
不要把生物问题放到环境学栏目下了啊~~~呵呵

如何使目的基因连接到质粒载体上,目的基因怎么获得呢? 如果我把目的基因连接到质粒载体上,这个载体质粒又有多个启动子,我怎么知道它用那个启动的呢把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计? 限制行内切酶切割质粒和目的基因后,目的基因是怎么和质粒连接的? 在构建基因表达载体时候,怎么利用选择培养基鉴别是质粒—质粒,目的基因—目的基因,还是质粒—目的基因 RT 已经获得了载体质粒和目的基因,把他们结合获得重组体的实验怎么做? 目的基因导入受体细胞是怎样进行的?如何防止目的基因与质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接?请我想问一个问题,我将一个目的基因连接到质粒上我想将这个质粒连同目的基因,一块扩增很多个请问：基因工程中用两种限制性内切酶切割如何避免出现质粒与质粒、目的基因与目的基因连接. 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒