已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/01 04:57:45

已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长
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我设计引物是用Omiga软件的,使用比较简单,只要新建一个核酸文件,把目的基因序列粘贴进去,扩增全长的话一般都是手工选取18～22bp长度,再加入内切酶碱基和保护碱基
（上游引物从第1个碱基开始,下游引物是从最后一个碱基开始往前选,记得下游引物要取反向配对的,选取好之后用Omiga软件里面的一个test Primer的功能,积分小于12就可以用了.然后在两条引物的5‘端加上你准备用的限制性内切酶的碱基序列,并加适当数量的保护碱基）
记住PCR扩增出来之后先电泳鉴定然后纯化,酶切,测序鉴定,全部没问题的话就可以和你的载体连接了.

已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长如何设计引物超表达基因的全长引物? 有一已知序列（1516bp）的基因,现在想要克隆这个基因,请问引物怎样设计?能不能直接克隆出全长?还有就是,一般所说的启一条非全长基因序列荧光定量pcr引物如何微调（指用primer或primerselect设计出的引物总是不太好）已知一个基因的mRNA和cDNA,我想克隆此基因,进行转染表达,但是设计的引物无法扩增出目的片段……急求! 设计实时定量PCR引物是根据基因的全长设计引物还是根据基因的开放阅读框设计引物? 【求助/交流】未知序列如何测得基因全长?如何从全长中筛选目的基因已知引物序列,如何知道目的基因的长度一段目的基因,帮忙设计引物. 请问您一个基因的全长已经克隆出来,怎样进行验证呢?从ATG和TGA设引物重新扩增,还是从非编区设引物呢关于引物设计要对目的基因进行定量分析,基因全长1932NT,是不是只要选择其中的一段就行了,长约400NT左右,那么这一已知部分基因序列,如何获得全长基因?