请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/27 21:59:53

请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?
最近一直在学PCR.

一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以得出这种基因在进化过程中的保守序列,根据这个保守序列设计引物来PCR,扩增出来的机率就大多了.

请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物? 不知序列的DNA模板PCR引物的设计如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物在GENBANK上面查到的线粒体DNA序列,接下来怎么设计PCR引物? PCR中引物是什么时候合成的?是模板DNA在高温下解旋后吗?不好意思,没有多少财富值了,请知道的告诉我下如何在pubmed上检索mRNA序列及设计合适的PCR引物? PCR的意义是不是要先知道具体DNA序列后才能设计引物进行PCR?如果是,那么我得到的是一段已知的序列,好像也可以人工合为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? 如何用 VECTOR NTI设计一段已知DNA序列的PCR引物 PCR中引物如何设计, 做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢? RT-PCR的引物如何设计?