【求助/交流】如何根据相近属种已知基因来设计引物去PCR未知基因

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/28 17:52:39

可以遵循的逻辑是比较已知的不同种属该基因序列,看看有没有很保守区.想要全长就很难了.:tiger05:ben1147(站内联系TA)EST库里blast找同源的,本物种里的est序列,拼接得到尽量长并且准确的序列,设计引物P,得到片段后RACE
要么直接用这个已知序列设计引物,多设计几对,碰巧哪对在保守区能P出来,就OK了.克隆测序,再做RACE.引物里可以加简并碱基,提高成功率,但是以特异性下降为代价,并且增加产物分析难度.
EST库里blast找同源的,本物种里的est序列,拼接得到尽量长并且准确的序列,设计引物P,得到片段后RACE
要么直接用这个已知序列设计引物,多设计几对,碰巧哪对在保守区能P出来,就OK了.克隆测序,再做RACE....我打算从其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物,通过PCR 方法扩增出相应的DNA 片段.但是这样成功的概率有多大?ben1147(站内联系TA)Originally posted by 小丁山 at 2010-10-12 16:43:34:
简并引物啦,希望是有的我从来没有做过这方面的实验,所以一无所知啊

【求助/交流】如何根据相近属种已知基因来设计引物去PCR未知基因设计实时定量PCR引物是根据基因的全长设计引物还是根据基因的开放阅读框设计引物? 【求助/交流】未知序列如何测得基因全长?如何从全长中筛选目的基因能否用已知植物的某个基因序列设计引物到另一种植物里去PCR,能否得到这个基因的序列呢? 为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物? 已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长如何设计rt-pcr 引物?怎样鉴别基因内的intron and extron? PCR的条件是已知目的基因的核苷酸序列?既然知道目的基因的核苷酸序列,为什么还要设计引物呢?直接根据已知序列写出引物核苷如何设计引物超表达基因的全长引物? 根据GenBank中p53基因的部分序列),设计引物,确定RT-PCR的参数,检测 p53基因在血细胞中的表达情况. 普通PCR和基因克隆PCR的引物设计有什么不同和注意事项? PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我