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可溶性蛋白测定用什么缓冲液,用的是考马斯亮蓝法,具体怎么配的

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/28 21:55:38
可溶性蛋白测定用什么缓冲液,用的是考马斯亮蓝法,具体怎么配的
常规用PBS或Tris-HCl都可,其实要求不是这么严格,如果害怕缓冲溶液有影响,单独做个缓冲溶液的阴性对照就行了啊,用水溶最简单.
再问: 我用0.1mol/l的,ph=7.8的缓冲液,测出来的值有的0。8几,有的0.7几,是不是值太大了,是否缓冲液的问题,急急急急!!
再答: 呵呵,我猜这个现象跟你缓冲溶液没有关系的,其实你只要掌握一个原则:样品一定要稀释到标准曲线的测定范围内才能用该标准曲线计算样品浓度的。 这个方法标准曲线就是以一定的蛋白浓度和其对应的吸光度值做标准曲线,然后把样品测定的吸光度值代入方程计算蛋白浓度。 这就是说你的标准曲线在你限定的蛋白浓度范围内与吸光度值呈线性关系,对应的有一个回归方程,那么你要用这个公式计算,你的蛋白吸光度也得稀释到这个对应的范围内,不然超过了这个范围,哪你就得另外做一组浓度的标准曲线了。明白了么?