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重组质粒不进行双酶切直接跑胶,条带应该是多少?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/04/30 02:35:30
重组质粒不进行双酶切直接跑胶,条带应该是多少?
别人给的质粒,看他们的文献,双酶切之后有两条,分别是490bp(目的基因的大小)和5400bp.现在,我打算把他们寄来的质粒直接去跑1%的琼脂糖凝胶电泳,先不进行双酶切,用10000的marker够了吧,如果有条带的话,也是这两条吗?还是别的情况呢?另外,他寄来的质粒是200ng/ul的,但是 只有一点点的量大概5ul 我做了2次转化都没有跑出条带,实在是量不够啊.我想用最后的1ul稀释成15ul,取5ul去跑胶,剩下的10ul做最后的转化.这样浓度会有影响吗?会因为浓度不够跑不出来吗?
别人给的质粒,第一要做的是转化保种啊,别人给那点哪够分析.转化完了自己抽质粒分析.质粒直接跑电泳理论上是三条带,要想分析建议做单酶切再电泳.
再问: 又做了一次,拿个质粒菌做阳性对照也都没有提出来。不知道是试剂盒的问题还是操作问题,重新换个试剂盒做做看。我就是在做转化,然后转化后提质粒没有