如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向)

如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向) 如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌中表达 基因克隆实验克隆实验问题 1、以cDNA为模板做PCR反应,得到的产物和预期的长度一样.2、再用pMD-19载体连接目的 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 1、如何以大肠杆菌的质粒DNA为载体克隆一个编码动物的技术的基并使之在大肠杆菌中表达2、简要说明实验中可能遇到的问题及解 含有目的基因的克隆载体打入生物体内,是如何表达蛋白的呢? 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 为什么pcr扩增后不直接进入表达载体,而要经过克隆载体呢?关键原因是什么呢? 利用细菌载体,克隆到一个编码植物光合作用蛋白的基因.证实该基因是否在根或其它非光合作用的组织中表达 求推荐克隆载体和表达载体