质粒跑胶三条带超螺旋线性和环状顺序
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 20:06:54
质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问:嗯,载体上没有通用引物,我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢,本
不是!线粒体和叶绿体内的环状DNA都不能称为质粒!质粒定义:细菌拟核外的遗传物质,为环形闭合的双股DNA,存在于细胞质中.
如果环形DNA被切断,形成一个线性双螺旋分子,然后用两手分别捏住线性DNA分子的两端,捻动其中的一端或两端同时向相反的方向捻动,双螺旋可以形成过旋(overwound,沿右手螺旋方向捻动)或欠旋(un
嗯,都是裸露的环状DNA分子.
如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.
我觉得用elutionbuffer没太大的影响,如果你非要觉得不好的话,只能在转化一遍重新提质粒或者抽成干粉再加水.我们一般用水就行.实在不行去测序呀.提的质粒和空质粒可以比较,如果你插入的基因足够大
能确定菌液pcr出来的就是目的条带吗?如果确定,那就是可能质粒抽提和酶切这两步出了问题
第二句更准确.主要原因是说“本质是分子”不合适,“化学本质是核酸”更恰当.至于“环状”,有点多余,但并没有错误,而且“脱氧核糖核酸”也是对“核酸”的进一步说明.
只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.再
别人给的质粒,第一要做的是转化保种啊,别人给那点哪够分析.转化完了自己抽质粒分析.质粒直接跑电泳理论上是三条带,要想分析建议做单酶切再电泳.再问:又做了一次,拿个质粒菌做阳性对照也都没有提出来。不知道
一般的酵母质粒转染是用环状形式来进行的,像酵母双杂交之类的.如果用线性化质粒一般都是为了在酵母中表达蛋白,转入的质粒会整合到基因组上的,仍然是线性.
好象有滚环复制和D环复制,环状结构都不会破坏,即使解链也只有一条
超螺旋DNA闭环DNA(closedcircularDNA)没有断口的双链环状DNA,亦称为超螺旋DNA.由于具有螺旋结构的双链各自闭合,结果使整个DNA分子进一步旋曲而形成三级结构.另外如果一条或二
单酶切?双酶切?一个位点?两个位点?单酶切一个位点,完全一条带,不完全两条带,单酶切两个位点,完全,两条带,不完全,三条带,双酶切,完全两条带,不完全,三条带再问:若是单酶切两个位点,出现一条带是什么
正向超螺旋:两股以右旋方向缠绕的螺旋,在外力往紧缠的方向捻转时,会产生一个左旋的超螺旋,以解除外力捻转造成的胁变.这样形成的螺旋为正超螺旋.反之为负超螺旋.
构成典型的dna右手双螺旋时,每10bp螺旋一周,所以400bp的dNa可形成40周螺旋.现在是32,说明有负超螺旋存在,负超螺旋数为8,你的问题答案为:有,负超螺旋8个(或简写—8).
不一定是细菌,比如酵母等真核生物细胞也有质粒细菌质粒也不100%都是闭合环状DNA(cccDNA)而且部分质粒可为RNA分子这个命题漏洞不少
我硕士专业是分子生物学这方面的,我可以很负责地告诉你,质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环开DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负
切开了吧.质粒没切开前是超螺旋,在电泳中比有切口的开环质粒跑得快.
质粒是细菌内的一种小型环状DNA,Ti质粒是具体的一种质粒——专指土壤农杆菌内的质粒.