农杆菌菌斑PCR鉴定
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 17:59:50
回复fine_2011的帖子大肠杆菌用鉴定培养基伊红美兰,枯草芽孢杆菌芽孢染色显微镜下看形态,八叠球菌是唯一有芽孢的球菌,芽孢染色就行,不过得先设计环境让它长芽孢查看原帖
质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问:嗯,载体上没有通用引物,我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢,本
不用呀,是用吸光度值来测定的,也就是OD值,农杆菌一般用OD600或OD550来测定.
楼上别扯了,那是为了让细胞膜流动性降低,利于DNA的结合,同时使细胞暂停生长,维持在对数生长期的高活性!
PCR即聚合酶链式反应是常用的快速扩增基因的方法.通过PCR可以鉴定到种具体步骤:1将培养过的微生物(最好是青年时代的)提取基因组(这步不清楚再问我)2通过PCR扩增,3测定基因序列4和已知的基因图库
另一条带在目的条带的上边且比较模糊的话,可能是引物二聚体,如果另一条也很明亮狭窄的话,估计是引物有错配.
不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问:我前些天去遇到一样的问题,酶切鉴定正确,但测序后什么也不是呢再答:所以
好办,营养琼脂并非营养,你把这种菌转接脑沁肉汤琼脂(BHIA)或者血平板上,看看生长情况,这两种平板营养比较丰富.如果生长良好,就把这种菌做API鉴定,或者上VITEK鉴定.
C58C1,LBA4404也不错
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根.根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-
是定向克隆粘末端连接?如果不是有连接反了的可能再有一种可能就是送去测序的菌液有问题我有次是同样的片段测序,菌液没出来,用测序引物PCR的产物测序就合适了,可能菌液污染了
用菌液行PCR还有一个小窍门,省很多事,就是你在挑菌落进行培养时准备1.5ML的EP管,每个管中加入1ML培养基,用接种针挑取菌落接种于EP管中,摇菌几个小时,摇动EP管观察,如果发现有混浊即可用来P
属于细菌,也叫乳酸菌.
芽孢杆菌属(bacillus),脂不酸芽孢杆菌属(aliyalobacillus),类芽孢杆菌属(Paemibacillus),喜盐芽孢杆菌属(Haloballus),短芽孢杆菌属(Breuibaci
对,鉴定胶,5*,2-5ul产物,2ulbuffer,多一点少一点问题不大.
转化前一天将需要做转化的野生型拟南芥苗子浇水浇透.于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul:10ml接种.28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按(1:400)及7
通过农杆菌介导,将外源基因转化到植物体上.
这个行吧?传统的细菌革兰氏染色法操作繁琐,初学者不易掌握,寻找一种简便方法.方法:玻璃片上将细菌与碱液混合,用接种环或接种针往上挑,观察有无丝状物出现,我们把它叫作“细菌拉丝实验”.结果:用本法鉴别细
农杆菌不是厌氧菌,而是好氧菌.我是做植物分子生物学的.农杆菌几乎天天用到.摇菌的时候要用摇床,这充分说明农杆菌是好氧菌.因为摇菌就是为了增加溶氧!上面几个不要误导提问者!
SeparationandPreliminaryIdentificationofTwoStrainsofIntestinalLactobacillusIsolatedfromChicken