农杆菌转化的具体步骤是什么?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/04/23 15:50:39

农杆菌转化的具体步骤是什么?
我想知道用农杆菌转化的具体步骤是什么,越详细越好.

转化前一天将需要做转化的野生型拟南芥苗子浇水浇透.
于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul：10ml接种.28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按（1：400）及750ul菌液转至汉300毫升YEP+K50+Rif中培养28℃,300rpm约14小时,次日上午8点测OD值,用YEP+Rif作为空白对照,当菌液达到OD600为1.3.0之内时,可收集菌体于250ml离心瓶（灭菌）,4℃,4000g 离心10min .用10%蔗糖（含0.02%silwet）稀释至OD600 约为0.8-- 1.0左右即,用10%蔗糖作对照.转化时将花在溶液中浸泡50s左右,于弱光下生长.

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