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细胞在接种在24孔板上时,孔的周围细胞密集,中间细胞稀少,怎样操作才能使细胞分布均匀?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/28 12:34:40
细胞在接种在24孔板上时,孔的周围细胞密集,中间细胞稀少,怎样操作才能使细胞分布均匀?
我的细胞在接种在24孔板上时,孔的周围细胞密集,中间细胞稀少,我试了很多次均如此.请问怎样操作才能使细胞分布均匀?
博凌科为周围细胞密集,中间细胞稀少这种情况一般是种板时培养液过少,液面总是呈一凹面,如果液面过低,孔中间就基本上没什么细胞,所以种板时一定不能吝啬培养液,待贴壁后可以用比较 少量的培养液处理周围细胞稀少,中间细胞密集:这种情况一般是种板后过于晃动,特别是旋转着晃动.有人才用十字方向的晃动方法使细胞分散均匀.但我个人认为,将细胞加入孔后,用枪或移液器充分吹打混匀后就不用,也不能再晃动,甚至拿着孔板走路带来的震动都会 让细胞往中间集中.当然,无论是哪种情况,首先都需要保证细胞在种板时时均匀分布的,即种板时的细胞悬液一定要混匀细胞分布均匀与否有一点很关键,即每种细胞是有个体差异的,别人的细胞操作不一定适合于你.所以要靠自己摸索,且找出专属于自己细胞的一套规律,就 我个人而言,有如下经验:1.所有待接种的细胞悬液在种板前一定要用吸管混匀.2.按资料记载,24孔板的液体量为1ml,个人也觉得1ml的量足矣.3.接种时,要慢慢加样,且记得轻微旋转枪头,这样做对细胞均匀分布有一定效果.4.接种后最好直接放入培养箱让细胞适应培养板这个新的环境,个人认为没有必要在室温放置一段时间.5.根据细胞的特性,细胞均喜欢聚集在边缘生长,所以我考虑到,你的问题还有可能是接种时的细胞密度不够,导致周边密集,中间稀疏的错觉.你的拌种 密度是多少?另要慢慢加样,且记得轻微旋转枪头的意思就是:加样不能太快,避免细胞在一个加样处聚集,且注意在不同的部位进行加样,即边加边活动枪头,人为 使细胞趋于均匀分布,我个人觉得有一定的效果,不知这次我解释清楚没有.