作业帮化验室中试管,吸管,培养皿,平板计数琼脂,生理盐水,乳糖胆盐发酵培养基应该怎样灭菌及灭菌要求?
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/02 01:25:07
化验室中试管,吸管,培养皿,平板计数琼脂,生理盐水,乳糖胆盐发酵培养基应该怎样灭菌及灭菌要求?
希望会的大师能把实验步骤用简单,明了的方法给我说下,
希望会的大师能把实验步骤用简单,明了的方法给我说下,
这几项的灭菌都以高压蒸汽为好.高压灭菌方法
1.将待灭菌器材、试剂放入高压蒸锅内,装液体的瓶中液体不能超过2/3,盖紧盖子后松动一圈,或用铝箔纸包紧；
2.高压灭菌开始时,先打开排气口,待热水蒸气排出数分钟后,关闭阀门灭菌,121度,20分钟.待压力降到0后放气；
3.灭菌后,让瓶子冷却,并及时扭紧瓶盖；
4.可以将高压蒸锅盖留一条缝,在加热至100度,冷却后高压蒸锅内的器材也自动烘干了.
5.一般器材开15-20分钟即可,液体30分钟.
注：
1． 有时装液体的瓶子可能破裂,可将瓶子放在钢制托盘中,防止瓶子一旦破裂时,试剂流入高压锅内.
2． 高压灭菌全过程中,应有专人看护.
3． 强酸、强碱、挥发性液体、爆炸性物质不能开蒸锅.
再问： 大肠菌群和菌落总数会做吗？步骤简单些，谢谢了。
再答： 可以。
1， 进入无菌室后，先把酒精灯点燃，然后在用酒精棉进行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脱脂棉中制成）
2， 准备双料管3根，单料管6根，培养皿7个。
3， 直接从原液中吸取10ml放入双料管，（3根每根各10ml）
4， 再吸取原液1ml放入单料管中（3根每根各1ml）
5， 再吸取原液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
6， 再吸取原液1ml放入盐水管中制成－1梯度的样液
7， 更换一根吸管，从－1梯度的样液吸取1ml样液放入单料管中（3根每根各1ml）
8， 再吸取－1梯度样液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
9， 再把每个培养皿中到入营养琼脂平铺底部摇允（注另作3个培养皿：空气空白，把培养皿打开十分钟倒入营养琼脂平铺底部摇匀。琼脂空白，把培养皿中倒入营养琼脂平铺底部摇匀。盐水空白，吸1ml生理盐水放入培养皿中，倒入营养琼脂平铺底部摇匀。）
10， 把全部作好的放入培养箱中，温度36C＋－1×C，大肠24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培养皿中的琼脂凝固后反转过来放入培养箱中）
11， 梯度：－1梯度为1ml原液加入9ml生理盐水配成
－2梯度为1ml－1梯度样液加入9ml生理盐水配成
－3梯度－4梯度配制方法和－1、－2梯度的配制方法一样
12， 如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36C，24H＋－2H 。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）
13， 取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中 ，然后再培养36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14， 再在伊红美兰平板之字形上挑菌，放到载玻片上作镜检。（方法见标准）
15， 只有镜检成紫红色和乳糖复发酵管产气同时成立的情况下，才能断定这根管是不合格。
16， 清洗消毒这根试管前必须进行消毒霉菌，121C，0。5小时同时不能放气。
1.将待灭菌器材、试剂放入高压蒸锅内,装液体的瓶中液体不能超过2/3,盖紧盖子后松动一圈,或用铝箔纸包紧；
2.高压灭菌开始时,先打开排气口,待热水蒸气排出数分钟后,关闭阀门灭菌,121度,20分钟.待压力降到0后放气；
3.灭菌后,让瓶子冷却,并及时扭紧瓶盖；
4.可以将高压蒸锅盖留一条缝,在加热至100度,冷却后高压蒸锅内的器材也自动烘干了.
5.一般器材开15-20分钟即可,液体30分钟.
注：
1． 有时装液体的瓶子可能破裂,可将瓶子放在钢制托盘中,防止瓶子一旦破裂时,试剂流入高压锅内.
2． 高压灭菌全过程中,应有专人看护.
3． 强酸、强碱、挥发性液体、爆炸性物质不能开蒸锅.
再问： 大肠菌群和菌落总数会做吗？步骤简单些，谢谢了。
再答： 可以。
1， 进入无菌室后，先把酒精灯点燃，然后在用酒精棉进行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脱脂棉中制成）
2， 准备双料管3根，单料管6根，培养皿7个。
3， 直接从原液中吸取10ml放入双料管，（3根每根各10ml）
4， 再吸取原液1ml放入单料管中（3根每根各1ml）
5， 再吸取原液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
6， 再吸取原液1ml放入盐水管中制成－1梯度的样液
7， 更换一根吸管，从－1梯度的样液吸取1ml样液放入单料管中（3根每根各1ml）
8， 再吸取－1梯度样液1ml放入培养皿中（2个培养皿各1ml）
9， 再把每个培养皿中到入营养琼脂平铺底部摇允（注另作3个培养皿：空气空白，把培养皿打开十分钟倒入营养琼脂平铺底部摇匀。琼脂空白，把培养皿中倒入营养琼脂平铺底部摇匀。盐水空白，吸1ml生理盐水放入培养皿中，倒入营养琼脂平铺底部摇匀。）
10， 把全部作好的放入培养箱中，温度36C＋－1×C，大肠24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培养皿中的琼脂凝固后反转过来放入培养箱中）
11， 梯度：－1梯度为1ml原液加入9ml生理盐水配成
－2梯度为1ml－1梯度样液加入9ml生理盐水配成
－3梯度－4梯度配制方法和－1、－2梯度的配制方法一样
12， 如果大肠初发酵产生气泡，用接种笔沾一个产气的液在伊红美兰平板上画之字形然后放入培养箱中36C，24H＋－2H 。（接种笔在每次使用前必须在酒精灯上消毒。所画之形不能划破伊红美兰琼脂表面）
13， 取出后在用接种笔在伊红美兰平板之字形上挑菌，放入乳糖复发酵管中 ，然后再培养36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14， 再在伊红美兰平板之字形上挑菌，放到载玻片上作镜检。（方法见标准）
15， 只有镜检成紫红色和乳糖复发酵管产气同时成立的情况下，才能断定这根管是不合格。
16， 清洗消毒这根试管前必须进行消毒霉菌，121C，0。5小时同时不能放气。
化验室中试管,吸管,培养皿,平板计数琼脂,生理盐水,乳糖胆盐发酵培养基应该怎样灭菌及灭菌要求?
化验室中试管,吸管,培养皿,平板计数琼脂,生理盐水,乳糖胆盐发酵培养基在灭菌锅中121度,
乳糖胆盐发酵培养基灭菌后为什么会变色?
制作培养基出现的问题近两次制作乳糖胆盐发酵管和营养琼脂,我已严格按照操作程序、灭菌时间、温度等要求操作,但灭菌完毕从蒸汽
乳糖胆盐发酵培养基在测定大肠杆菌中,为什么单料和双料试管里面的小试管有气泡是怎么回事?怎么高温灭菌都没有用,气泡仍然还在
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培养皿 培养基如何灭菌
培养皿、培养基、灭菌、消毒
制作培养基出现的问题我想可能是试管的塞子塞得太紧才导致小管有气泡吧.但为何用灭菌时产生气泡的乳糖胆盐发酵管一起高压灭菌的
胆盐乳糖培养基、乳糖胆盐培养基及乳糖胆盐发酵培养基的区别
实验室消毒灭菌方法需要用到 吸管 镊子 生理盐水 培养皿 桌面 手 求师哥师姐
请问乳糖胆盐发酵培养基灭菌后在冰箱内（4-6度）,能存放多长时间还能继续使用?