RNA提取过程中氯仿萃取之后加无水乙醇析出沉淀太多,漂洗离心时,上述部分沉淀无法溶解,为什么呢?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/30 07:31:01
RNA提取过程中氯仿萃取之后加无水乙醇析出沉淀太多,漂洗离心时,上述部分沉淀无法溶解,为什么呢?
加完氯仿是用异丙醇析出RNA,我们是用75%的乙醇(用DEPC水来配)洗涤,乙醇是去各种离子的,无水乙醇不能去除离子,洗完之后一定要完全晾干,然后加入适量的DEPC水,在60度中水浴,直至溶解,如果部分沉淀不能溶解,那可能是含有其他物质,你可以将溶解的部分吸到另一个灭菌的管子中,这部分应该是会有溶解有RNA的.
再问: 我是用trizol试剂盒提取的,可能是因为提取的组织比较复杂,所以杂质比较多,昨天又做了一下,吸附柱吸附RNA离心下来的废液中都沉淀了很多,做了4组,其中一组的A260/280才1.76,可能是蛋白没去干净,不知还能否再次吸附下用去蛋白液去一次蛋白,这样提高其RNA的纯度?
再答: 其他三组呢?RNA一般只提一次,如果不好一般也不会再重复,否则RNA几乎都被酶解了,最后重新提。
再问: 我是用trizol试剂盒提取的,可能是因为提取的组织比较复杂,所以杂质比较多,昨天又做了一下,吸附柱吸附RNA离心下来的废液中都沉淀了很多,做了4组,其中一组的A260/280才1.76,可能是蛋白没去干净,不知还能否再次吸附下用去蛋白液去一次蛋白,这样提高其RNA的纯度?
再答: 其他三组呢?RNA一般只提一次,如果不好一般也不会再重复,否则RNA几乎都被酶解了,最后重新提。
RNA提取过程中氯仿萃取之后加无水乙醇析出沉淀太多,漂洗离心时,上述部分沉淀无法溶解,为什么呢?
DNA提取中加入无水乙醇,有明显的丝状DNA出现 高速离心沉淀后DNA却不见了
酚氯仿抽提DNA体系后出现的现象及成因,沉淀DNA时为什么要用无水乙醇
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