作业帮求大师们详解：elisa回收实验怎么做?
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/01 02:41:00
求大师们详解：elisa回收实验怎么做?
回收方法一：样品前处理时加入标准液
方法二：样品前处理后加标液
平均回收：方法一,同一个样品加标高中低三个浓度的平均回收率值
方法二,3个样品各做平行样,低浓度回收率的平均值,外加中浓度 和高浓度的
还请大师们详解啊
回收方法一：样品前处理时加入标准液
方法二：样品前处理后加标液
平均回收：方法一,同一个样品加标高中低三个浓度的平均回收率值
方法二,3个样品各做平行样,低浓度回收率的平均值,外加中浓度 和高浓度的
还请大师们详解啊
elisa做回收率就是给自己找麻烦
回收实验的评估及数据处理方法
操作过程按说明书操作
1. 实验样本的基本要求和制备方法
（1）选择合适浓度的常规检测样本,分为体积相同的3-4份.
（2）在其中2-3份样本中加入不同浓度相同体积的待测物标准液制备待回收分析样本,加入体积小于原体积的10%,制成2-3个不同加入浓度的待回收分析样本,计算加入的待测物的浓度.
（3）在另一份样本中加入同样体积的无待测物的溶剂,制成基础样本.
如：
①基础样本血清：血清1ml（含被测物浓度为X1）+双蒸水(最好用不含被测物的基质液)0.1ml;
基础样本浓度＝X1/(1+0.1)
②回收样本1:血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X2）; 加入浓度为:X2/(1+0.1) 低
③回收样本2：血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X3）; 加入浓度为:X3/(1+0.1) 中
④回收样本3：血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X4）; 加入浓度为:X4/(1+0.1) 高
2.实验过程
用待评价系统对待回收分析样本和基础样本进行测定,通常对样本进行3次重复测定,计算均值,取其均值进行下述计算.
测定浓度加入浓度 回收浓度 回收率%
基础样本
分析样本1
分析样本2
分析样本3
3.数据处理及结果报告
（1）加入浓度C=标准液浓度×[标准液加入体积/(样本体积+标准液体积)]
（2）计算回收率：
回收率n = (测定待回收分析样本浓度均值-测定基础样本浓度均值) / 加入浓度
（3）计算平均回收率：
平均回收率 = (样本1的回收率+样本2的回收率+样本3的回收率) / 3
（4）计算每个样本回收率与平均回收率的差值：
每个样本回收率与平均回收率的差值＝回收率n－平均回收率
如差值超过±10%,应查找原因并纠正,重新进行评估.
（5）计算比例系统误差：
比例系统误差 = |100% - 平均回收率| 一般小于5%
（6）结果评估：
结果至少应满足相关国际及国家标准,同时满足临床需求.
注意事项: elisa做回收率时应注意低浓度避免前滞效应的发生.高浓度应避后滞效应(钩状效应)
个人见意义基础血清浓度不要太高.否则做不到理想值.理论上来说越低越好做
回收实验的评估及数据处理方法
操作过程按说明书操作
1. 实验样本的基本要求和制备方法
（1）选择合适浓度的常规检测样本,分为体积相同的3-4份.
（2）在其中2-3份样本中加入不同浓度相同体积的待测物标准液制备待回收分析样本,加入体积小于原体积的10%,制成2-3个不同加入浓度的待回收分析样本,计算加入的待测物的浓度.
（3）在另一份样本中加入同样体积的无待测物的溶剂,制成基础样本.
如：
①基础样本血清：血清1ml（含被测物浓度为X1）+双蒸水(最好用不含被测物的基质液)0.1ml;
基础样本浓度＝X1/(1+0.1)
②回收样本1:血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X2）; 加入浓度为:X2/(1+0.1) 低
③回收样本2：血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X3）; 加入浓度为:X3/(1+0.1) 中
④回收样本3：血清1ml+0.1ml标准溶液（浓度X4）; 加入浓度为:X4/(1+0.1) 高
2.实验过程
用待评价系统对待回收分析样本和基础样本进行测定,通常对样本进行3次重复测定,计算均值,取其均值进行下述计算.
测定浓度加入浓度 回收浓度 回收率%
基础样本
分析样本1
分析样本2
分析样本3
3.数据处理及结果报告
（1）加入浓度C=标准液浓度×[标准液加入体积/(样本体积+标准液体积)]
（2）计算回收率：
回收率n = (测定待回收分析样本浓度均值-测定基础样本浓度均值) / 加入浓度
（3）计算平均回收率：
平均回收率 = (样本1的回收率+样本2的回收率+样本3的回收率) / 3
（4）计算每个样本回收率与平均回收率的差值：
每个样本回收率与平均回收率的差值＝回收率n－平均回收率
如差值超过±10%,应查找原因并纠正,重新进行评估.
（5）计算比例系统误差：
比例系统误差 = |100% - 平均回收率| 一般小于5%
（6）结果评估：
结果至少应满足相关国际及国家标准,同时满足临床需求.
注意事项: elisa做回收率时应注意低浓度避免前滞效应的发生.高浓度应避后滞效应(钩状效应)
个人见意义基础血清浓度不要太高.否则做不到理想值.理论上来说越低越好做