液相色谱中,调节流动相pH值能影响主峰色谱吸收吗?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/01 19:59:06
液相色谱中,调节流动相pH值能影响主峰色谱吸收吗?
在色谱柱耐受的范围内,流动相pH值的改变影响最大的是色谱峰的保留时间,保留时间改变进而峰形也随之改变.在反相色谱条件下,分析的物质在流动相中处于完全解离状态时,出峰最快;而处于全部非解离状态下,出峰最慢;有部分解离时,峰形应该是比较差的.
采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术.对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相反.分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液.
注:流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互作用,减轻或消除峰拖尾现象.所以在这种情况下有机胺(如三乙胺)又称为减尾剂或除尾剂.
采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术.对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相反.分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液.
注:流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互作用,减轻或消除峰拖尾现象.所以在这种情况下有机胺(如三乙胺)又称为减尾剂或除尾剂.
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