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RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用

来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/29 02:21:39
RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用
RNA反转录过程步骤如下：
将提取的RNA用DEPC水吹起,加入引物1、引物2,加入dNTP,放入70度水浴5min,冰浴1min,然后加入DTT\BUFFER酶,37度水浴2h,70度水浴10min,冰浴2min.
请问70度水浴,37度水浴,冰浴在实验中起什么作用?
第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合.
第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA.
37度水域是让cDNA聚合.
第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一链.
第二次冰浴是为了让cDNA-RNA复性成为cDNA-RNA杂合双链.
明白没有?
RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用 RNA的提取和反转录的实验步骤? RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样? 2微克RNA反转录后的cDNA浓度大约为多少 mRNA反转录形成cDNA 大致分为哪些步骤? 提取得总RNA有蛋白质污染会影响反转录的CDNA的浓度吗 做RNA反转录,合成cDNA第一链时,不加DTT可以吗? 由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤? mRNA如何反转录成cDNA? 什么叫第一链 cDNA反转录试剂盒,反转录不就是从RNA到DNA么,不就一个链么,为什么叫第一链 为什么荧光定量要提RNA,然后再反转录称cDNA,而不直接提DNA 2012新课标卷第40（4）反转录作用的模板是MRNA,产物是CDNA.若要在体外获得大量反转录产物,常采用PCR技术.