PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/03 02:56:30
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:
1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;
2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有目标条带,即使可能并不清晰;
3.选取最清晰的温度,在PCR体系中设置镁离子浓度梯度,选取最理想的条件.
如果是以前曾经成功扩增、现在条件一样却没法重复的,个人经验要特别注意下模板DNA的质量、尤其是PH值.另外由于不清楚您实验的细节、所用试剂和反应条件,如有误解还请见谅...
1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;
2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有目标条带,即使可能并不清晰;
3.选取最清晰的温度,在PCR体系中设置镁离子浓度梯度,选取最理想的条件.
如果是以前曾经成功扩增、现在条件一样却没法重复的,个人经验要特别注意下模板DNA的质量、尤其是PH值.另外由于不清楚您实验的细节、所用试剂和反应条件,如有误解还请见谅...
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了?
PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对
做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因?
PCR目的条带的问题,
RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些?
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.
求PCR,PCR获得的目的基因中含有SalI酶切位点,而引物也引入了salI位点,现在一双酶切就切出来3条带,
PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办
pcr结果出不来,每次都是只有100bp以下的条带,没有其他的条带
PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我
我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因.