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帮我设计个实验,ELISA的..

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/28 02:04:20
帮我设计个实验,ELISA的..
实验内容是测鸡血液中IgG的含量,现有药品有分次提取的待测鸡血;鸡IgG;兔抗鸡IgG...
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步骤:
1包被:用包被缓冲液稀释待测鸡血(可以稀释成不同的浓度,如1:100,1:1000,1:10000),包被液稀释鸡IgG(要做背比稀释),100ul/孔,4度过液.
2封闭:3%BSA的PBST,100ul/孔,4度过夜或37度1h.
3一抗:用含1%BSA的PBST稀释兔抗IgG(比例按照抗体的说明书)100ul/孔,37度1h
如果这个抗体应该是HRP标记的.可以直接加底物反应,如果不是还需要再加一步孵育HRP标记的抗兔抗体.
4底物显色:加TMB显色液(这个公司都有卖的)100ul/孔.避光10-15分钟.
5终止:2M硫酸终止.
6酶标仪检测.
最后根据标准品作标准曲线,样品的OD带入标准曲线计算浓度.