作业帮Bradford法测蛋白浓度（考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度）严重非线性
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/27 14:44:08
Bradford法测蛋白浓度（考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度）严重非线性
请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐标值上升越为缓慢,这是什么原因?做了数次都是同样结果.真郁闷
请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐标值上升越为缓慢,这是什么原因?做了数次都是同样结果.真郁闷
Bradford assay的线形关系有一定限制,在2 µg/ml 到 120 µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.
另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.考马斯亮蓝的显色原理好像是由于考马斯亮蓝分子与某两个氨基酸的基团（具体不记得了）发生反应.如果你这是混合蛋白的话,蛋白的氨基酸构成比例也有很大差异的话,很可能得不到直线.
不过看你的曲线还有一定趋势,估计你是稀释的倍数不符合标准.
另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.考马斯亮蓝的显色原理好像是由于考马斯亮蓝分子与某两个氨基酸的基团（具体不记得了）发生反应.如果你这是混合蛋白的话,蛋白的氨基酸构成比例也有很大差异的话,很可能得不到直线.
不过看你的曲线还有一定趋势,估计你是稀释的倍数不符合标准.