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基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是--G

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/30 22:47:33
基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是--G

基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是--G↓GATCC--;,限制酶II的识别序列和切点是--↓GATC--。根据图示判断下列操作正确的是: 

A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

C.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割

D.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割

用二酶切割目的基因产生平末端,而用一酶切割质粒产生粘性末端,一长一短,能接上吗????但如果都用酶二,会把两个标记基因都破坏掉。 用酶一切目的基因,目的基因切不下来。

正确答案选C

怎么回事

好吧 之前弄错了 一般情况下,要把目的基因连接,需要用同一种或同两种限制性内切酶酶切质粒和目的基因.在本题中,酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分,如果质粒用酶II处理,那么在geneI和II区都会被切断,质粒变成了两段线性序列.所以质粒只能由酶I酶切.
如果目的基因用酶I处理,那么目的基因与质粒只有一段能够相连(目的基因的左边被酶I切割形成粘性末端,质粒gene I区被酶I切割成粘性末端.但是目的基因的右端不能被酶切,所以不能与质粒相连).
用酶I切割质粒后,gene II区形成两个粘性末端(GATC);用酶II切割目的基因后,两段形成的粘性末端均为GATC.两者可以连接,形成闭合环状.