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已知基因名和cDNA位点,如何找到相对应的DNA序列上的位点?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/01 00:53:02
已知基因名和cDNA位点,如何找到相对应的DNA序列上的位点?
例:已知基因名PLEC,NM_201384,exon1,c.14A>G.现在要验证c.14A>G这个位点是否发生突变.我在NCBI中可以查到这个基因相对应的mRNA的序列,可以以mRNA序列设计引物么?这对因为可以对gDNA进行扩增么?c.14这个位点对应到gDNA序列中是哪个位点?
你找的14a在这里,通过上下游的碱基搜索就可以了.
可以根据mRNA序列设计引物,扩增gDNA,但必须注意,引物必须在同一个exon上.如果扩增的片段跨了一个或几个intron,还要用到long PCR的酶.
有个比较简单的方法,反转录mRNA,以cDNA为模板,就没有上述的限制了.
再问: 多谢!
不过这个点是如何确定的?怎样才能保证引物在同一个exon上呢?
再答: 引物设计软件,例如PP6,可以设定引物的位置