如何提高外源基因片段在原核细胞中表达量

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 21:29:17

如何提高外源基因片段在原核细胞中表达量

在实际情况下, 在做克隆插入片段的时候已经把有的序列优化了 (例如选择较常见的密码子), 以两个TAA来有效终止 (基本上一个也够啦). 其他的都已经由你选择的那个载体决定了.
到了蛋白表达这步, 首先选择在什么细胞系里表达啦. 原核细胞(大肠杆菌吧)一般要试不同的strain (细胞系), 有的是翻译系统经过优化的( 例如使信使RNA更稳定啦, 增加几个罕见的转运RNA来对应那些罕见的密码子啦), 有的是细胞里有辅助蛋白的 (使你要表达的蛋白能准确折叠). 转化涂板之后得到很多colony, 一定要试多个不同的克隆(colony), 因为天知道有的克隆就是表达得比另一个好. 另外还有这些变量要去优化: 诱导的时间 (细胞密度, 测OD600, 一般在0.6左右为佳), 诱导剂 (例如IPTG)的浓度, 蛋白表达的温度和时间 (经验证明,温度真是很重要!) .
希望对你有帮助~

如何提高外源基因片段在原核细胞中表达量如何提高外源基因片段在原核细胞中的表达量请说明在原核细胞中表达真核基因,合成真核蛋白存在的主要问题. 为什么真核基因在原核细胞中表达出来的蛋白质常常失去活性真核基因在原核细胞中表达需要解决哪些问题高中生物：若将真核基因在原核细胞中表达,对该目的基因的基本要求是：“无内含子" 为什么? GUS基因可以在大肠杆菌bl21中表达吗?如何检测是否表达以及表达量的多少啊? 如何计算出表达量最大的基因? 寻找基因,急!请提供一个已经可以顺利表达的基因（当然是导入原核细胞中表达）,谢谢! 将真核细胞的基因导入原核细胞中内含子会表达吗如何提高蛋白质的表达量如何提高蛋白质的表达量?