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基因工程实验设计题设计一个实验:使植物水通道蛋白基因在大肠杆菌中表达设计一个实验:让猪的生长激素基因在大肠杆菌中表达设计

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/20 21:33:55
基因工程实验设计题
设计一个实验:使植物水通道蛋白基因在大肠杆菌中表达
设计一个实验:让猪的生长激素基因在大肠杆菌中表达
设计一个实验:在酿酒酵母中表达植物生长激素
三种都是一类的题目!
1、收集目的基因的mRNA(因为没得内含子),然后用各自特异的引物进行RT-PCR扩增目的基因(也就是水通道蛋白基因,猪的生长素基因和植物生长激素的基因)!
2、限制酶切载体(比如E.coli,酵母质粒等)和目的基因,当然如果目的基因上没有合适的酶切位点还要先加衔接物(有合适位点的小段DNA),然后连接载体和基因!
3、选择成功的重组子,然后克隆产生大量的菌落或细胞!
4、用之前同一种酶酶切重组子,电泳测序!
5、收集纯化的的基因片段,和表达载体连接(如果是原核要载体加入原核的启动子调控序列等)转化到宿主细胞进行表达!
6、收集纯化表达的蛋白质!