泰医已知某一蛋白质的氨基酸组成序列,如何从细胞中克隆到该蛋白的编码基因
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/01 23:49:11
泰医已知某一蛋白质的氨基酸组成序列,如何从细胞中克隆到该蛋白的编码基因
(1) PCR法:将该蛋白质的氨基酸序列转译成相应的DNA序列,根据此序列合成一对引物.提取某一组织细胞的总RNA,通过逆转录合成cDNA,再用已合成的引物对cDNA进行PCR扩增,即可获得该蛋白的编码基因
(2) cDNA文库法:首先构建某一组织细胞的cDNA文库.将该蛋白质的氨基酸序列转译成相应的DNA序列,取其中一段到基因库中与其他蛋白质基因对比,找出同源性最小的一段,作为引物.以此引物进行逆转录PCR,获得这段DNA序列,然后以此为引物在cDNA文库中“钓”出该蛋白的编码基因.
(3) 基因组文库法:首先构建某一组织细胞的基因组文库.将该蛋白质的氨基酸序列转译成相应的DNA序列,取其中一段到基因库中与其他蛋白质基因对比,找出同源性最小的一段,作为引物.以此引物进行逆转录PCR,获得这段DNA序列,然后以此为引物在基因组文库中“钓”出该蛋白的编码基因.
(2) cDNA文库法:首先构建某一组织细胞的cDNA文库.将该蛋白质的氨基酸序列转译成相应的DNA序列,取其中一段到基因库中与其他蛋白质基因对比,找出同源性最小的一段,作为引物.以此引物进行逆转录PCR,获得这段DNA序列,然后以此为引物在cDNA文库中“钓”出该蛋白的编码基因.
(3) 基因组文库法:首先构建某一组织细胞的基因组文库.将该蛋白质的氨基酸序列转译成相应的DNA序列,取其中一段到基因库中与其他蛋白质基因对比,找出同源性最小的一段,作为引物.以此引物进行逆转录PCR,获得这段DNA序列,然后以此为引物在基因组文库中“钓”出该蛋白的编码基因.
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