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我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列

来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/04/27 17:37:52
我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列
我要克隆一个基因,从NCBI查到该基因近似物种的mRNA(没有查到cDNA).
我的路线是先提取RNA,反转录成为cDNA,由cDNA进行PCR,得到该基因.但是,在引物设计时,我不清楚是应该用近似物种的mRNA序列进行设计,还是用cDNA序列进行设计.如果用cDNA序列进行设计的话,我是否只需用在线工具转换一下即可?
理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.
我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列 引物设计问题,以mRNA序列设计引物,然后用cDNA为模板来扩增,在设计引物时mRNA序列是否要反转序列? 有关基因克隆的问题请问我现在知道洋葱某个基因的中段序列,并且已经提取出了总RNA并进行了反转录.请问如何根据中断序列设计 mRNA反转录中使用olig（t）18做引物所得到的是单链cDNA吗?如果是的话如何才能得到双链的cDNA啊? cDNA与mRNA是相同还是互补的序列? 我最近在构建RNAi载体.在寻找目的基因cDNA与其他基因的非同源序列时,是与DNA比对,还是与cDNA?谢 已知一个cDNA的3'端部分序列,得到该基因的全长cDNA NCBI上能查mRNA序列吗,是不是只能查到对应cDNA的序列,如果能直接查到mRNA序列的话,能否告知一下怎么查? 我现在有了一个基因的cDNA序列,现在想找到这个基因的内含子序列,怎么办? 提取得总RNA有蛋白质污染会影响反转录的CDNA的浓度吗 mRNA如何反转录成cDNA? 组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗