怎样以钙离子处理细胞能使之处在吸收DNA的状态?为什么钙离子能?

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/28 03:02:32

怎样以钙离子处理细胞能使之处在吸收DNA的状态?为什么钙离子能?
答：
怎样处理：将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中.
为什么钙离子能：会造成细胞膨胀,同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞.
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感受态细胞（competent cell）：理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态.
CaCl2法：
操作：
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞.
细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物.
2.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激（90s）,细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源DNA就可能被细胞吸收.进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状.
3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆.

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