作业帮带鱼细菌 dna 提不出来
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/18 15:33:21
带鱼细菌 dna 提不出来
连续提了几天了,之后马上跑了电泳,没一次成功的.到底是什么原因.GenElute Bacterial Genomic DNA kit 试剂盒 能不能提出dna来呢.
带鱼上面应该有菌的吧,有没有用过这个试剂盒的达人帮帮忙,分析下.
我主要是研究带鱼储藏过程中的腐败微生物组成，因此用总DNA提取试剂盒提，先是用灭菌的剪刀把带鱼肉（0天的）都剪成小块，再均质后再取的试样。（用移液枪从均质袋里面取液体试样，不知道这里面是不是有菌）因为试剂盒说明书都是英语的，所以只能一点点摸索，进度也比较慢。但是基本都按照说明做下来了。
后来相同的方法提了一次4天的带鱼，还是没有出腐败菌的DNA。前几天用手提法提取了7天的（鱼都有腐臭了，肯定有菌了吧），结果竟然也提不出来了，弄得一点信心也没有了。我是本科生，论文卡在这里了，急得不行。
连续提了几天了,之后马上跑了电泳,没一次成功的.到底是什么原因.GenElute Bacterial Genomic DNA kit 试剂盒 能不能提出dna来呢.
带鱼上面应该有菌的吧,有没有用过这个试剂盒的达人帮帮忙,分析下.
我主要是研究带鱼储藏过程中的腐败微生物组成，因此用总DNA提取试剂盒提，先是用灭菌的剪刀把带鱼肉（0天的）都剪成小块，再均质后再取的试样。（用移液枪从均质袋里面取液体试样，不知道这里面是不是有菌）因为试剂盒说明书都是英语的，所以只能一点点摸索，进度也比较慢。但是基本都按照说明做下来了。
后来相同的方法提了一次4天的带鱼，还是没有出腐败菌的DNA。前几天用手提法提取了7天的（鱼都有腐臭了，肯定有菌了吧），结果竟然也提不出来了，弄得一点信心也没有了。我是本科生，论文卡在这里了，急得不行。
直接提肯定不行的,因为量太少（和带鱼的DNA相比）.两个办法：
1,直接用无菌棉签沾取带鱼表面样本,然后直接做PCR（参考TA TOPO克隆直接筛选的步骤）.你需要设计合适的鉴别引物.
2,培养扩增后再提.但是有假阳性（污染）,和假阴性（培养基不对）的可能.
还有就是你已经提出来了,但是含量太少.电泳不能显示,直接做PCR看看.
1,直接用无菌棉签沾取带鱼表面样本,然后直接做PCR（参考TA TOPO克隆直接筛选的步骤）.你需要设计合适的鉴别引物.
2,培养扩增后再提.但是有假阳性（污染）,和假阴性（培养基不对）的可能.
还有就是你已经提出来了,但是含量太少.电泳不能显示,直接做PCR看看.