GC含量超过60%的引物可用吗

追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差 引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? 在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子 pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以 PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增 带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? 一段DNA序列为：acgttgatgcaggtg.cgtgcagaacaggct,可用于PCR扩增的引物对是： 请问ISSR标记的引物是通用引物吗?本人要做披碱草属方面的ISSR标记,发我一些引物信息. 如何理解Tm= 4(G+C)+2(A+T).比如说一段引物的G+C含量为40%,那么这段引物的Tm值是多少? 棉与化纤混纺面料缩水吗?棉的含量超过多少会缩水/ miRNA的qPCR的引物Tm值有什么要求吗?60℃左右行吗,还是上游引物需要高点啊?