作业帮PCR反应退火温度的高低与什么因素有关
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/29 17:40:57
PCR反应退火温度的高低与什么因素有关
退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素.引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度.引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低.虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升.相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起扩增效率下降,甚至无扩增产物出现.引物的退火温度可以通过Tm=4(G+C)+2(A+T)公式组略估算,一般在算出的Tm值上减去5摄氏度极为较合适反应设计退火温度.