作业帮 > 生物 > 作业

求救!pcr产物没有条带...

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/13 16:02:10
求救!pcr产物没有条带...
前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照
觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次制胶很小心了,缓冲液也是新的.
问题最大是pcr产物竟然一个都没有出来,我把模板也跑了一次,是有条带的,没有完全降解掉.虽然模板没有很纯,但是以前也是可以P出来了,还有,如果PCR真没P出来,为什么没有出现引物二聚体啊?求救!
目的片段为750左右,跟质粒一样
首先要确定引物是否降解了,pcr常用的引物都是10p浓度的,如果四度放久了会降解,既然以前能做出来,那么很可能是引物降解了,而且你的阳性对照是有条带的说明PCR的体系和条件是没问题的,所以推测引物出问题了,重新稀释一些引物再试试吧,PCR条件也可以变变,做个touchdown试试,