作业帮什么是层析分离法
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/29 04:40:54
什么是层析分离法
利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法.有吸附层析、分配层析两种.一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析.
层析利用物质在固定相与流动相之间不同的分配比例,达到分离目的的技术.层析对生物大分子如蛋白质和核酸等复杂的有机物的混合物的分离分析有极高的分辨力.基本原理 层析须在两相系统间进行.一相是固定相,需支持物,是固体或液体.另一相为流动相,是液体或气体.当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程.随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这个过程叫展层.
系数K是物质在两相中的浓度比.K值大,则在固定相中吸附牢,K值小吸附差.各物质间的K值差别大,则易被分离.不同类型层析的K值含义不同,可视为吸附平衡常数,分配常数或离子交换常数等.
研究层析现象而发展的塔板理论,与有机化学实验中的分馏法原理有些相似.被分馏的有机溶剂在分馏柱内的填充物上形成许多热交换层,从而把低沸点溶剂先分馏出来,达到纯化的目的.在层析时用理论塔板数n来衡量层析效能.
tR为物质在层析柱上的保留时间,W为洗脱下来的物质峰形的宽度.n值愈大表示层析柱的效能愈高.如用理论塔板高度H表示,则包含了层析柱长度的因子.
式中L为层析柱的柱长.H值越大,则柱效越低.
此外影响层析分离效果的还有涡流扩散、纵向扩散和传质阻抗等因素.因此选择层析固定相支持物的粒度、均匀度等物理性能,流动相的层析系统和温度等都是做好层析的关键.
层析利用物质在固定相与流动相之间不同的分配比例,达到分离目的的技术.层析对生物大分子如蛋白质和核酸等复杂的有机物的混合物的分离分析有极高的分辨力.基本原理 层析须在两相系统间进行.一相是固定相,需支持物,是固体或液体.另一相为流动相,是液体或气体.当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程.随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这个过程叫展层.
系数K是物质在两相中的浓度比.K值大,则在固定相中吸附牢,K值小吸附差.各物质间的K值差别大,则易被分离.不同类型层析的K值含义不同,可视为吸附平衡常数,分配常数或离子交换常数等.
研究层析现象而发展的塔板理论,与有机化学实验中的分馏法原理有些相似.被分馏的有机溶剂在分馏柱内的填充物上形成许多热交换层,从而把低沸点溶剂先分馏出来,达到纯化的目的.在层析时用理论塔板数n来衡量层析效能.
tR为物质在层析柱上的保留时间,W为洗脱下来的物质峰形的宽度.n值愈大表示层析柱的效能愈高.如用理论塔板高度H表示,则包含了层析柱长度的因子.
式中L为层析柱的柱长.H值越大,则柱效越低.
此外影响层析分离效果的还有涡流扩散、纵向扩散和传质阻抗等因素.因此选择层析固定相支持物的粒度、均匀度等物理性能,流动相的层析系统和温度等都是做好层析的关键.