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【求助】如何证明A蛋白可以磷酸化B蛋白

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/30 05:32:33
【求助】如何证明A蛋白可以磷酸化B蛋白
不知是否可选?在ATP存在时,A+B共反应,然后电泳,磷酸化的蛋白跑的慢.
其实就是激酶活性的检测嘛!
做个体外磷酸化反应,提细胞蛋白,免疫沉淀激酶A,在含32P-ATP和B的buffer里反应,最终看有没有Phospho-B.
当然也可以不用同位素,现在这方面的试剂盒多了.
化成岩说的也有道理,如果你的蛋白等电点不高的话,可以跑个glycerol-page等不含SDS的,磷酸化和非磷酸化的能分出来.iris_palm wrote:其实就是激酶活性的检测嘛!
做个体外磷酸化反应,提细胞蛋白,免疫沉淀激酶A,在含32P-ATP和B的buffer里反应,最终看有没有Phospho-B.
当然也可以不用同位素,现在这方面的试剂盒多了.