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福林试剂绿色一直不退怎么办?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/28 19:09:20
福林试剂绿色一直不退怎么办?
今天一整天在配福林试剂.回流10个小时以后,加了硫酸锂和液体溴后,绿色一直不退,如今邮过去2个小时了,怎么破?
溶液绿色一直不退,需再加数滴液溴,再蒸沸除去,冷却后定容至1000.1、原理:蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色(生成钼蓝和钨蓝化合物).蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定.2、福林试剂的配制:于2000ml磨口回流装置内加入钨酸钠(Na2WO4?℉2O)100g,钼酸钠(NaMoO4?℉2O)25g.水700ml,85%的磷酸50ml,浓盐酸100ml,文火回流10h,加入硫酸锂(Li2SO4)150g,蒸馏水50ml,混匀取去冷凝器,加入几滴液体溴,再蒸沸15min,以驱逐残溴及除去颜色,溶液应呈黄色.若溶液有绿色,需再加数滴液溴,再蒸沸除去,冷却后定容至10003、测定方法将1ml标准蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸缓冲液加入试管中,在40℃保温10min,迅速加入1ml酶液,保温15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反应.取滤液1ml加入0.55M的碳酸钠溶液5ml和福林试剂0.5ml,40℃水浴10min显色,在OD680处比色.