怎么确定Ser195和His97参与构建胰凝乳蛋白酶活性中心

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 15:07:34

酶活性中心的鉴定方法
1）化学修饰法
　　观察酶分子被一定的化学试剂修饰前后酶活性的变化情况,结合其它方法,推断该基团是否为活性中心的功能基团.如胰凝蛋白酶与二异丙基氟磷酸（DIFP）作用即会失去活性.DIFP能与酶分子中的Ser残基共价结合,胰凝乳蛋白酶中有28个Ser 残基,而与DIFP作用的仅仅是其中的Ser195.这表明Ser 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的组成部分.
2）亲和标记法
　　是使用一个能与酶的活性中心特异结合的正常底物类似物作为活性部位基团的标记试剂.该类似物不能为酶所催化而发生化学反应,却能与酶的特定基团发生共价结合使酶失活.如N-对-甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮（TPCK）是胰凝乳蛋白酶的亲和标记物,当用C14 标记的TPCK与胰凝乳蛋白酶一起保温时,酶即失活.结构分析证明TPCK 与酶分子中的His57发生作用.说明His57是活性中心的另一组成部分.
3）X-射线衍射分析法
　　可直接观察酶与底物的结合情况.

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