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PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/02 01:02:32
PCR电泳胶切下以后去做TA克隆,胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做?
浓度不是问题,关键是你要加入足够量的DNA.具体来说,载体与目的片段的摩尔比要为1比3到1比10.一般市场上的T载体大约是0.03pmol/ul的浓度,也就是说你要加入0.06-0.3pmol的插入片段.对于1000bp左右的线性DNA分子,0.3pmol时的量约为200ng.目的片段浓度太低的话,你可以扩大连接体系来做.