博凌科为的2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光染料法)有什么要注意的没有呀?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/07 01:22:20
博凌科为的2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光染料法)有什么要注意的没有呀?
博凌科为的2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光染料法)是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂.已经将热启动HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSA和SYBR Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点.使用时只需加入模板和引物和水,便可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对目的基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高.本品采用全新的Hotmaster Taq DNA 聚合酶,该酶不同于一般Hot-start 酶之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而Hotmaster Taq DNA 聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭Hotmaster Taq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性.
注意事项:
1.本制品不含内参染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX内参染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,配套ROX产品货号为PC38 Rox Reference Dye.
2.本制品含SYBR® Green I 强光下易分解,降低敏感度,使用时避免长时间强光照射本制品.
3.建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增.可以提高扩增特异性,减少背景.
4.本制品含有4 mM MgCl2(反应体系终浓度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 优化Mg2+浓度.
注意事项:
1.本制品不含内参染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX内参染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,配套ROX产品货号为PC38 Rox Reference Dye.
2.本制品含SYBR® Green I 强光下易分解,降低敏感度,使用时避免长时间强光照射本制品.
3.建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增.可以提高扩增特异性,减少背景.
4.本制品含有4 mM MgCl2(反应体系终浓度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 优化Mg2+浓度.
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