求问[求助]提取总RNA必须要用多少pH值的苯酚?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/09 22:47:05
求问[求助]提取总RNA必须要用多少pH值的苯酚?
不是只用TRIZOL,氯仿,异丙醇,75%乙醇,RNase-free water就行了吗?还要用苯酚吗?djrhewc(站内联系TA)我们好像也没用到...linxi8579(站内联系TA)我们提RNA是用的试剂盒,好像里面也没有苯酚.就是有裂解液,洗脱液,漂洗液等等,问起来好像没有.我记得的具体的就是用乙醇来沉淀,还有用RNAse-free水溶解.gastrodia(站内联系TA)NaAc饱和酚,pH4.5,酸性环境是抽提RNA必须的,过酸又会导致RNA酸水解,使用酸酚抽提,在加入氯仿涡旋后离心,RNA处于微酸性的水相,DNA和蛋白质被压在两相之间(如果两相你都不知道,那基础太差,找本分子克隆来see吧),如果上层水相呈碱性,DNA会混在RNA之间erictan2046(站内联系TA)谢谢各位虫友,原来!我之前用的苯酚是pH7.8.0提取DNA的,原本以为这样没有差别,但是这点就出错了!我老是做来做去做不出东西来!还真的不知道呀!
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