我是高效液相初学者,现在想做一种提取物质含量的测定.可是在做高效的时候遇到问题了,
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/29 01:53:54
我是高效液相初学者,现在想做一种提取物质含量的测定.可是在做高效的时候遇到问题了,
问题是这样的,我前天开始做高效液相,不过跑对照样品跑不出来,昨天就换了个流动相配比,结果跑出来了,而且我预实验提取的物质也跑出来了,出峰与对照品是一样的.可是今天却没那么幸运,今天由于其中一种流动相溶液用完了,我另配了1L,然后继续上样跑,可是不知道为什么就是跑不出来,我用的流动相配比、流速、柱温也是设置一样的.可是不管是对照品还是我的样品都好,都是不出峰.
本人不幸感激.
问题是这样的,我前天开始做高效液相,不过跑对照样品跑不出来,昨天就换了个流动相配比,结果跑出来了,而且我预实验提取的物质也跑出来了,出峰与对照品是一样的.可是今天却没那么幸运,今天由于其中一种流动相溶液用完了,我另配了1L,然后继续上样跑,可是不知道为什么就是跑不出来,我用的流动相配比、流速、柱温也是设置一样的.可是不管是对照品还是我的样品都好,都是不出峰.
本人不幸感激.
第一,检查你配置的流动相是否正常,如果是正相的话可能稍微一点区别对保留时间的影响都很大;第二,你可以试试延长走样的时间,看看对照品是否可以出来,注意样品的浓度是否合适;第三,检查仪器是否正常运行,如泵流量和压力,是否漏液,进样器进样状况,柱子是否漏液等等;希望这些对你有帮助吧
再问: 首先要谢谢您的回答。我昨天又再跑了一天,刚开始又磷酸二氢钾作为流动相(跟最开始能跑出来的流动相是一样的,但是昨天和前天用这个流动相就没再跑出峰来了),后来我又换成磷酸二氢钠作为流动相这次是可以跑出来了,可是也是出问题,问题是这样的,我一直都是用对同样的对照品来跑,可是却跑出来的峰的出峰时间不稳定,一会在五分钟左右出峰,一会在七分钟左右,又一会在八分钟,还有两次更离谱的是在十一分钟左右出峰
再答: 你注意一下你的压力是不是正常的,或者比较缓和的曲线,如果波动较大还是跟你的仪器不稳定造成的。另外跑缓冲盐的流动相,用完后一定要及时的用含水的不含盐的流动相去冲仪器和柱子,否则损害会很大。
再问: 首先要谢谢您的回答。我昨天又再跑了一天,刚开始又磷酸二氢钾作为流动相(跟最开始能跑出来的流动相是一样的,但是昨天和前天用这个流动相就没再跑出峰来了),后来我又换成磷酸二氢钠作为流动相这次是可以跑出来了,可是也是出问题,问题是这样的,我一直都是用对同样的对照品来跑,可是却跑出来的峰的出峰时间不稳定,一会在五分钟左右出峰,一会在七分钟左右,又一会在八分钟,还有两次更离谱的是在十一分钟左右出峰
再答: 你注意一下你的压力是不是正常的,或者比较缓和的曲线,如果波动较大还是跟你的仪器不稳定造成的。另外跑缓冲盐的流动相,用完后一定要及时的用含水的不含盐的流动相去冲仪器和柱子,否则损害会很大。
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