一个引物PCR扩增出的多个条带为什么亮度会不同?

正反向引物就是一个引物是从3端开始,另一个是从5端开始的.看分子生物学的书吧,里面有详细介绍DNA复制的啊,就是那些理论而已.解释的太简单了,我做过pcr扩增的实验,不懂得可以问我,我尽量回答.

如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有

引物3'端末端有互补序列,这样造成引物以引物为模板进行延伸,造成引物二聚体.

合成的单链在实验时又一个和模板结合的退火过程,在这个过程中会自动形成茎环结构,如果你的茎环结构设计合理的话.我也在类似文献上看到过上游引物含有额外的碱基,上面有说明的,是为了调整Tm值.上游引物不能全

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

1.引物设计不够特异,检查你的序列,去BLAST看看.2.退火温度过低,检查你的引物的Tm,检查你的程序设置.

当然可以咯,不过我没明白为什么上游引物GCrich跟分两段扩增有什么关系,1.2K一次扩增是完全没有问题的,如果上游引物出现GCrich的情况,那么可以考虑在更加上游的地方设计引物啊,在这个基因外测的

因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物（PCR中是DNA,而生物体内是RNA）来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

150bp我是用你的引物blast,找到相应的匹配结果.尽管菌种不同,但是对于你的引物而言,有两组序列（JN562715.2；JQ010853.1）均显示PCR结果为150bp,所以你的片段长度很可能

解题思路：PCR技术解题过程：varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.p

为什么只有10个碱基配对呢?引物总长多少?再问：加上3bp保护碱基和9bp酶切位点。总长19bp再答：晕死，这么短，一般引物都是18-20bp，再加上保护碱基和酶切位点好吧再问：好吧。谢谢你啊！又合成

我也遇到过类似的问题,根据同源性设的引物来PCR,结果出来的是非特异条带,要不就是没有.还是得优化条件比如引物和模板的比例

原因很多,你是否提到了DNA,可以将你跑的DNA直接跑胶看看,到底有没有条带；PCR扩增的程序有没有问题,或者引物是否有问题,可以找个对照DNA试试,相同扩增条件下,是否扩出条带,如果扩不出来就用可能

一般是不要切胶,直接把第一次的PCR产物取一微升作为底物,再用第二队引物扩增一次,如果引物设计正确,就只会出现一条条带了.如果要计算大小,就按楼上说的.但是雀式pcr的目的就是至少做2次,以保证特异性

用dl2000marker的话,在750bp（从上往下第三条带）和1000bp（第四条带）之间,

PCR产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带,实际上有多个分子.也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带.如果只是进行PCR产物回收,没有进行凝胶分离的过程的话,东西可能更多了.问题

这要具体分析.一种可能是你的PCR产物是非特异性片段,所以长度不一,这可以通过和你预期PCR产物的长度进行比较来判断.另一种可能是该基因在不同情况下有不同的剪接模式（alternativesplici

一般来说,引物都是成对设计的,包括上游引物和下游引物；除非你设计出来的上游引物与下游引物相同,才可用单引物扩增.否则,若用单引物则只能扩出一条链再问：用单引物扩增出的产物跑电泳，在紫外灯照射下的条带是

1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题