T载体M13-R的引物序列-搜答案-拍题作业网

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

从NCBI中下载基因的序列,再用DNASTAR进行比对,那是保守区域!

去这里找找吧,有很多载体序列的,有图有文字http://www.lablife.org/p?a=vdb_view&old_id=351&id=再问：里面没有啊，NCBI里面也没有，为什么会查不到这个载

可以制品说明pMD18-TVector、pMD19-TVector是一种高效克隆PCR产物(TACloning)的专用载体.这两种载体分别由pUC18、pUC19载体改建而成,在pUC18、pUC19

PS：如果你要测序的话,直接给测序公司说你要测序,人家有pCAMBIA-1300-5'和pCAMBIA-1300-3'通用引物的.

你先设计几条引物,然后上NCBI数据库BLAST一下（在外显子上设计比较好些）再问：我的想法是先将已知的序列与同源物种比对，以同源物种多出的区域设计上下游引物，可是这样得到的引物分值太低，怎么办再答：

M13F(-47)：CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACM13R(-48)：AGCGGATAACAATTTCACACAGGA

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/194473617?report=genbank

FPrimer:5'-TTGTAAAAAAATTAAATTAA-3'RPrimer:5'-CATATTTTAATTAATATTTC-3'你这个序列AT含量太高,尤其是5'端A有7个连续重复,引物本身很

可以找一下原始文献,或到ncbi里搜索一下.另外ncbi里有个premer-blast可以试一下.---中国西部生命科学论坛再问：primerblast主要进行序列比对，NCBI没有查询到。

理论上讲PCR产物可以直接酶切连接反应.但是,以PCR产物酶切的时候没有办法证明双酶切是否成功、彻底（PCR产物会有ployA的存在必须切掉,但是PCR产物和酶切产物大小差别不大）.而以T载体为媒介,

试试primer软件.

基因bank里面有~

在NCBI中进行primerBLAST就可以了.

是不是你的引物扩出了非特异的条带啊,可能是你引物设计问题,不排除你模板问题.如果只是回收过程中紫外造成的突变,不应该是整个基因都不对,如果其他序列比对没有问题,只是酶切位点的问题,你要考虑是不是突变了

对于这种情况,如果你只是找不到扩增引物的序列,但是能找到后面所要扩增的序列的话,那么可能还是因为测序引物离你的扩增片断太近.如果不是这种情况,那么可能是你根本没有将扩增片断成功连入当然还有一种可能是公

正规生物公司合成引物不是应该提供序列的吗,而且一般都是自己设计引物序列交给生物公司帮你合成啊,怎么会没序列呢,要是你知道货号可以直接联系合成的公司询问呀

我有一个关于primer5的使用技巧的文档,你需要的话可以给你,里面介绍很详细,其实引物设计都是很简单的,自己多试试就很简单了

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握

真想由衷的说一句懒死你,网上到处是,就不自己查.Forward(17mer):5′-(GTTTTCCCAGTCACGAC)-3′（2956-2972）Reverse(17mer):5′-(CAGGAA