作业帮逆转录得到cDNA直接送测序,可以吗
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 23:38:13
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特异性会很差吧毕竟内含子会把外显子分割成很多段
理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.
可以,RNA提取的质量要好,纯度要高
逆转录reversetranscription：以RNA以模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化.其过程先以RNA为模板,合成RNA/DNA杂化双链,然后水解RNA链,再以剩下
1先根据部分序列设计一对引物验证一下序列是否正确（很确信就免）,需要的话克隆,有文库的话杂一下文库；2根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列；3同时设计巢氏引物,进行3’RACE
哈哈.刚看完吧.我的理解是他四千万是基金公司的.给他的是四千万赢得的利益.节目预估年收益百分之八再问：而且还只是七天再问：估计不到一万块钱的收益吧再答：祝你开心你每一天
通过NCBIblast得到全长,设计引物,PCR获得基因全长.再问：NCBIblast是什么？麻烦说的详细些再答：NCBI是个网站，美国国家生物信息中心http://www.ncbi.nlm.nih.
做什么定量半定量都是一样的.样品最好有相同的处理.组织重量上最好接近,不用完全一样.因为抽了RNA之后还要定量,我的经验是取2500ng的RNA量做反转,之后就一样了
题目再答：没听清
不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.再问：那么我引物设计的时候，是不是以mRNA为模版与以CDNA为模版设计的引物都可以？再答：都可以，别忘
是的,是单链.想获得双链,请看如下：为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链.与RNA链
1、以mRNA为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,在逆转录酶作用下,合成DNA单链2、以DNA单链为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,继续合成DNA另一条链,两条DNA链形成cDNA
cDNA一般是不检测的,并且也不好检测,因为你的cDNA都是mRNA,电泳出来会是一条弥散的带.并且上样量需要较大才能看间.需要检测的是提取的RNA,看是否28s和18srRNA是否清晰、明显(二者位
区分你的模板里面是否有基因组污染的方法：在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶.得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话,你的模板就
1、理论上所有表达出来的mRNA都能够被转录成cDNA,所以合成的cDNA含有目的基因和内参基因.获得的cDNA是不是扩增的总RNA的全长,要看究竟有多长,一般2kb左右能得到全长,由于逆转录酶效率的
只含有引物往前的一段序列一条mRNA上只有一个基因所以不存在什么下游所有基因而且反转录是从mRNA的3‘到5’走的.再问：原核生物的mRNA怎么会只有一个基因呢？原核生物的基因不是以操纵子形式存在的吗