pcr产物滞留在点样孔-搜答案-拍题作业网

首先你要有你目的产物和测序的DNA序列在网页最下端第二行有AligntwosequencesusingBLAST(bl2seq),点击进入看到有Sequence1和Sequence2,这里面分别输入你

在PCR的优化开始阶段,应用新的DNA模板,引物或热稳定DNA聚合酶等材料建立的PCR方法,其扩增效果一般总不是最佳的.这种PCR反应通常要求尽量抑制非特异性扩增和（或）增加目的DNA产物的产率.表1

PCR的退火温度是引物与模板之间的,而realtimePCR最后的退火温度是产物之间的

准备材料：白线,502胶水,保鲜膜用2米长的白线（稍微粗一点的）,扎成一个圆圈,用502刷一遍,晒干,这样就固定形状了,然后在上面用保鲜膜覆成拱形的顶,边缘用502粘好,其余的就是考虑重物该怎么吊了,

加热曲别针

面积面积大,垂直方向上与空气接触多,所受阻力大,滞留时间长

是分别和两条链配对的序列.你可以在纸上画一下,第一次扩增时假设可以从引物向另一端无限延伸,那第二个循环时以一端是上游引物片段的序列为模板,从另一端的下游引物延伸过来,延伸到和上游引物第一个碱基处就终止

使用标准浓度内参.

当然可以的.

酶切位点多数时候是反向回文结构,因此你看到的正向序列与反向互补序列是相同的,所以在两个方向的引物上看,酶切位点序列完全一样.

问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话）,已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件

能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性

恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.

不用加.如果自己混PCR的各种料,就要加.

原理：是来至于双脱氧链终止法——现在应用最多的核酸测序技术,由Sanger等1977年提出：模板经过测序PCR反应后形成3'末端带有荧光标记（早期用同位素标记）的相差一个碱基的不同长度的产物,再根据每

我也不是什么专家,只是做论文的时候研究过一段时间.我不太明白你的问题,不是cDNA,怎么能用RACE呢,RACE不是cDNA末端快速扩增技术(rapidamplificationofcDNAends,

对PCR产物进行变性时加的染液应该就是变性缓冲液吧,应该买试剂盒里面会有.在94度上放置5分钟后迅速放在冰上防止DNA复性就是了.再问：你好，还在吗，在94度进行变性5min，这个过程和PCR循环是没

如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的.选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以（

电泳的目的是看DNA片段的长度,而电泳上DNA移动速度除了受片段长度的影响还受到其结构的影响.让DNA变性,所有样品都是线形DNA.这时所有电泳上所有DNA的移动速度只和其长度有关.

你需要保存多久?我最多放过两三天,没问题再问：我周三晚上扩增出来的，结果给忘记放冰箱了，刚刚才放进去，后边要做DGGE，还可以用么？再答：不好意思DGGE实验我没有操作过。但是从理论上来说，2天不会降