诱导表达为何要设计引物

不需要只要你扩增出来的包含了该基因的完整CDS序列上面有起始密码子和终止密码子再问：多谢你的回答。我没有表达清楚我的意思。我是从一段基因上118-600碱基的位置，扩增目的基因，这一段基因没有起始密码

Oligodt不需要设计,用试剂盒里面的就行.如果你RT的引物想用自己的,那你需要扩增的基因序列应该是明确的吧.RT的时候'引物没太多的选择性,mRNA序列跟反义链配对,因此RT的引物要根据正义链（就

完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你

怎样用primer-blast设计引物http://wangyufeng222.blog.163.com/blog/static/128222070201110511213331/

用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问：等于白说

只能两头设计你不知道基因名字么实在不行拿序列去BLAST上比对下也能知道它前后是啥啦

构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!

泛泛的说没有意义,因为基因不同引物设计难度和引物大小不同,以及之后的PCR难度都不相同,所以费用差别很大.建议直接询问可以代做试验的生物技术公司.再问：那大致有个范围么，求指教啊大侠！再答：找公司代做

ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.

因为你是设计半定量RT-PCR的引物,所以你并不需要全长的ORF,只要一部分序列就可以了.这样你在设计引物的时候,将内源基因和外源转入基因进行比对,选取二者特异性的区域设计两对引物.一对是内源基因的特

您应该使用巢式PCR来做这个实验.无论您是先提RNA再做反转录,还是直接从DNA中获得基因,考虑到模板的复杂性,都应当使用巢式PCR.建议您先从目的基因的上下游设计一段引物,即外引物,再根据目的基因上

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段

一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.

cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.

用primerpremie

一、可以使用oligo6或者primer5等软件设计.用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数.二、如果你的序列同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经

是从NCBI里面的序列库中搜索的,自动搜索符合筛选条件的序列,从而给出引物序列blast是要求NCBI里面有的序列才能验证.你研究的物种基因组测序结果发布了吗?如果发布了的话就不用担心序列不全了

首先查道你的基因序列（NCBI搜）,第二查引物设计原则,第三下载个引物设计软件设计,简单好用的有primerpremier5.0,这些都能在网上搜到,软件用法也能搜到.

一般使用primer5就挺好,不知道你是扩基因还是启动子,基因是否是已知.PCR引物设计原理:PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关

引物种类多了,看你设计哪种引物了.如果你想在基因组或者cDNA上P一个基因,这个基因在物种上是一个家族,你肯定就要和本物种内其他家族成员进行比较,避开保守区,以免设计的引物P到那些基因.你要是想尽可能