作业帮酶的添加量问题,希望大家能帮我解决这个问题,谢谢了,呵呵
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/25 11:40:21
酶的添加量问题,希望大家能帮我解决这个问题,谢谢了,呵呵
我的问题：
我想通过酶解测水解度,确定最佳的酶,但是对酶的添加量遇到了一些麻烦,我看一般的文献都是根据加酶量来算,例如,酶解鱼,选取了两种酶,确定这两种酶哪个水解比较好,称完一定的样品以后,物料比确定,每种酶的最适PH,温度已经调好,就差酶了,这酶该添加多少,一般类似文献都是按照加酶量1000U/g,如果我也用这个加酶量,换完之后具体应该添加多少g酶?
这就是我的难题,我第一次做的时候是所有酶都添加了0.15g,这是我同学告诉的,后来我想按照文献上的做一下,可是实验做完以后发现两次做的结果不一样,有差距,我就想到底是哪里不对了,我按照加酶量一定算的,得通过计算公式导出添加多少克酶,我想是不是我计算公式没做好?计算需要酶活比,我直接就用酶包装袋上的酶活去计算了,是不是这个错了?第二次做的实验确实与文献上的差不多,想不明白,到底是哪出错了
请大家帮我解决一下好吗?
我的问题：
我想通过酶解测水解度,确定最佳的酶,但是对酶的添加量遇到了一些麻烦,我看一般的文献都是根据加酶量来算,例如,酶解鱼,选取了两种酶,确定这两种酶哪个水解比较好,称完一定的样品以后,物料比确定,每种酶的最适PH,温度已经调好,就差酶了,这酶该添加多少,一般类似文献都是按照加酶量1000U/g,如果我也用这个加酶量,换完之后具体应该添加多少g酶?
这就是我的难题,我第一次做的时候是所有酶都添加了0.15g,这是我同学告诉的,后来我想按照文献上的做一下,可是实验做完以后发现两次做的结果不一样,有差距,我就想到底是哪里不对了,我按照加酶量一定算的,得通过计算公式导出添加多少克酶,我想是不是我计算公式没做好?计算需要酶活比,我直接就用酶包装袋上的酶活去计算了,是不是这个错了?第二次做的实验确实与文献上的差不多,想不明白,到底是哪出错了
请大家帮我解决一下好吗?
1、反应中添加多少酶 不需要根据公式计算成g 购买的商业化的酶的单位是什么 就用什么 通常就是mol/L
2、在确定酶的最佳用量时 对酶进行梯度稀释 固定底物浓度 加入酶和底物后读动力学 作图分析取EC80作为反应浓度
3、由于实验环境、所用物质的批次和用量等差异客观存在,所以有所差异是正常的,至于你说的有差距,到底差距是多少呢?通常而言,如果要求不是特别高的话,实验的结果与文献报道在3-5倍之内都是acceptable的,如果文献中是100uM,而我们得到的结果是300uM,看似差距非常大,实际上是可接受的.超过5倍要分析原因,重新实验验证.如果要求严格,实验结果与报道值在3倍以内是被认可的.
再问： 我还有一个小问题，就是你知道复合蛋白酶一般地酶活是多少？你知道几种酶的酶活？是不是每个厂家其酶活也是不一样的？我目前的实验室的酶没有说明书了，具体是多少酶活也不是很清楚了，用不用重新买
2、在确定酶的最佳用量时 对酶进行梯度稀释 固定底物浓度 加入酶和底物后读动力学 作图分析取EC80作为反应浓度
3、由于实验环境、所用物质的批次和用量等差异客观存在,所以有所差异是正常的,至于你说的有差距,到底差距是多少呢?通常而言,如果要求不是特别高的话,实验的结果与文献报道在3-5倍之内都是acceptable的,如果文献中是100uM,而我们得到的结果是300uM,看似差距非常大,实际上是可接受的.超过5倍要分析原因,重新实验验证.如果要求严格,实验结果与报道值在3倍以内是被认可的.
再问： 我还有一个小问题，就是你知道复合蛋白酶一般地酶活是多少？你知道几种酶的酶活？是不是每个厂家其酶活也是不一样的？我目前的实验室的酶没有说明书了，具体是多少酶活也不是很清楚了，用不用重新买