作业帮怎样从土壤中筛选微生物
来源：学生作业帮 编辑：拍题作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/04/25 07:32:02
怎样从土壤中筛选微生物
原理：目前尚无一种培养基可以养出所有的微生物,但我们可以设计一种培养基,其组成份适合所要分离的微生物,而不利其他微生物的生长,如此一来,即使我们想分离的微生物为数不多,也可以将它们分离出来,这就是选择性培养基.本实验就是使用选择性培养基来分离土壤微生物,并计数它们的数量以及观察在不同的选择性培养基下,菌落型态的差异.
材料：分离细菌之培养基：TSA（Tryptic Soy Agar）、1/10 TSA 并分别添加100 ppm cycloheximide；分离放线菌之培养基：Alkaline Water Agar、Starch-Casein Agar并分别添加100 ppm cycloheximide；分离真菌之培养基：PDA（Potato Dextrose Agar）添加Triton X-100 (1 mg per mL)及100 ppm streptomycin sulfate、MRB（Martin’s Rose Bengal）再加入30 ppm streptomycin sulfate； (cycloheximide为抑制真核细胞蛋白质合成之抗生素,请小心使用)、9毫升0.85%生理食盐水、玻璃弯棒、酒精灯、少许农地表土.
步骤：
1.配制选择性培养基.
2.秤过筛农土 1克置入9毫升生理食盐水中,充分震汤混合,接著作10倍连续稀释至适当的稀释度.
3.取0.1毫升稀释液涂抹於不同的选择性培养基平板上.分离细菌取104、105及106倍稀释之稀释液；分离放线菌取103、104及105倍稀释之稀释液；分离真菌则取102、103及104倍稀释之稀释液.
4.涂抹过稀释液之平板置於28℃培养箱中培养,按时观察并记录菌数、菌落型态、真菌孢子的颜色等.
5.另外,秤10克湿土置入玻璃烧杯中,於105℃下烘乾至恒重,将烧杯连烘乾後的土放入乾燥器中,冷却至室温後秤重,即可知每克湿土的乾重.将平板上的菌数除以乾重,就可以知道每克乾重土壤的菌数.
6.以t-test 做统计比较,细菌在相同养分但不同浓度下(TSA、1/10TSA)的数目有无差异；另外由分离放线菌的平板,纯化 5个菌落型态不同之菌株,同时保留由真菌平板上所筛得的绿黴菌（Trichoderma spp.）,作为下次实验的材料.
材料：分离细菌之培养基：TSA（Tryptic Soy Agar）、1/10 TSA 并分别添加100 ppm cycloheximide；分离放线菌之培养基：Alkaline Water Agar、Starch-Casein Agar并分别添加100 ppm cycloheximide；分离真菌之培养基：PDA（Potato Dextrose Agar）添加Triton X-100 (1 mg per mL)及100 ppm streptomycin sulfate、MRB（Martin’s Rose Bengal）再加入30 ppm streptomycin sulfate； (cycloheximide为抑制真核细胞蛋白质合成之抗生素,请小心使用)、9毫升0.85%生理食盐水、玻璃弯棒、酒精灯、少许农地表土.
步骤：
1.配制选择性培养基.
2.秤过筛农土 1克置入9毫升生理食盐水中,充分震汤混合,接著作10倍连续稀释至适当的稀释度.
3.取0.1毫升稀释液涂抹於不同的选择性培养基平板上.分离细菌取104、105及106倍稀释之稀释液；分离放线菌取103、104及105倍稀释之稀释液；分离真菌则取102、103及104倍稀释之稀释液.
4.涂抹过稀释液之平板置於28℃培养箱中培养,按时观察并记录菌数、菌落型态、真菌孢子的颜色等.
5.另外,秤10克湿土置入玻璃烧杯中,於105℃下烘乾至恒重,将烧杯连烘乾後的土放入乾燥器中,冷却至室温後秤重,即可知每克湿土的乾重.将平板上的菌数除以乾重,就可以知道每克乾重土壤的菌数.
6.以t-test 做统计比较,细菌在相同养分但不同浓度下(TSA、1/10TSA)的数目有无差异；另外由分离放线菌的平板,纯化 5个菌落型态不同之菌株,同时保留由真菌平板上所筛得的绿黴菌（Trichoderma spp.）,作为下次实验的材料.