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怎样获得一个有功能的基因片段

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/03/28 20:18:37
怎样获得一个有功能的基因片段
要研究一个基因的功能,要让这个基因正常的转录和翻译.那么这个基因除了包括CDs,还应有什么原件,是启动子和终止子吗?不好意思,
要让某个基因正常转录和翻译,除了这个基因的CDS以外,还需要启动子,起始密码和终止密码(这两个通常包括在CDS内),polyA加尾信号.如果在真核中表达,最好在起始密码前加一个kozak序列,以增强表达水平.
  一般商品化的表达载体通常都含有上述元件,所以你只要把CDS克隆到表达载体就行了.
再问: 我已经把一段目的片段导入到表达载体中了,后来老板说还要加入荧光蛋白。请问,荧光蛋白应该加在目的片段的什么位置?图片是载体的多克隆位点,构建好是要导入到细菌中表达的。希望你能多多指导
再答:   荧光蛋白既可以接在目的蛋白的N端,也可以接在目的蛋白的C端。具体接哪个位置,最好参考一下该蛋白别人的作法,原则是以不影响目的蛋白功能为前提。无论接哪端,要注意起始密码子和终止密码子的问题。