我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?
来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/04/27 03:56:37
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?
发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有补碳源一般补什么?是葡萄糖还是甘油?
发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有补碳源一般补什么?是葡萄糖还是甘油?
你问的问题太宽泛,要想得到满意的答复最好能具体点,比如你用的E.coli菌株、表达蛋白的一些情况、发酵规模、你想采用的工艺等等.
具体来说以下几个步骤是共有的:
1.种子(具体几级要看你的实际情况)最后一级一般接种量10%-15%
2.前期培养,根据工艺可以采用FBC或BC工艺方法,营养原则是不多不少.
3,.诱导阶段,此时以蛋白表达为主,碳源除了乳糖最好不要有其他的,氮源还是需要适当补加,另外诱导时间也是一个重要参数,这要结合你的工艺产品来确定.
4.放罐,最重要的考虑因素就是不要让菌种变衰老而自溶.
以上是我的浅见,有什么具体问题可以再探讨.
具体来说以下几个步骤是共有的:
1.种子(具体几级要看你的实际情况)最后一级一般接种量10%-15%
2.前期培养,根据工艺可以采用FBC或BC工艺方法,营养原则是不多不少.
3,.诱导阶段,此时以蛋白表达为主,碳源除了乳糖最好不要有其他的,氮源还是需要适当补加,另外诱导时间也是一个重要参数,这要结合你的工艺产品来确定.
4.放罐,最重要的考虑因素就是不要让菌种变衰老而自溶.
以上是我的浅见,有什么具体问题可以再探讨.
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