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怎样去除黄单胞杆菌的质粒

来源:学生作业帮 编辑:拍题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/18 03:10:58
怎样去除黄单胞杆菌的质粒
我要用无质粒的黄单胞做感受态.
不知你的质粒是否有标记,一般消除细菌的质粒的方法就是:使用液体振荡培养,让你的细胞一直处于对数生长期,连续传代10次以上,然后就稀释涂平板,将单克隆挑选出来,逐个检查,看哪个克隆丢失了质粒即可.
操作的原理就是:质粒一般不随染色体一起复制,其复制稍有滞后,并且其存在对细菌有一定的负担.当细菌处于对数生长期时,质粒的数量会持续减少,但当细菌停止生长时,质粒又会不受控制的再次复制,所以要一定要较长时间的让细菌处于对数生长期,液体振荡培养时,细菌对数生长最快,因此质粒丢失最快.丢失质粒的细菌的生长速度较未丢失的快,所以获得无质粒的细胞的机率还是比较大的.