Easy-T-vector 与蓝白筛选

来源：学生作业帮编辑：拍题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/01 19:57:47

Easy-T-vector 与蓝白筛选
我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正常表达?所以无论连接是否成功,都只有白斑没蓝斑.如果这样,为何产品说明书上还说可以做蓝白筛选?

线性化的T-载体末端多出T,无法自连为环状,你用线性化的T-载体直接转化DH5a,T-载体进入细胞后仍然是线性的,所以质粒无法编码β-半乳糖苷酶N端的146个氨基酸,也就不能形成a-互补,所以形成白斑.但形成的白斑应该很少,因为线性化的质粒导入细胞是比较困难的.这一点是正常的.你的理解也很正确.
为何产品说明书上说可以做蓝白斑筛选呢?
因为我们用T-载体都是同外源基因连接后才导入细胞的,切线性化质粒很难导入细胞,所以几乎可以认为在IPTG-X-gal平板上出现白斑的就是阳性克隆（并非百分百是）,所以说明书上也就这么说了.

基因工程中的α互补和蓝白筛选的原理为什么蓝白筛选时,筛选出的白色菌落要将进一步鉴定?哪些方法能确认阳性克隆? 为什么我们众多的科技英语老师,从来搞不清diplacement vector与position vector的区别? 二维数组怎样加入到vector,先去掉与vector相同元素的部分. 蓝白斑筛选培养基怎么配啊?新手 vector< vector > v(m,vector(n) cats are easy（容易的）to keep.我认为easy是形容词又不是动词那么easy与keep之间为什么填t vector是什么意思? 关于t载体基因工程中常提到t载体（t-Vector),请问什么是t载体,t载体有什么作用 promise don t come easy. Promises Don't Come Easy, Promise Don't Come Easy